穩定細胞系是指將外源基因整合到宿主細胞基因組中，使外源基因能夠在宿主細胞中長期穩定表達，這樣的細胞系稱為穩定細胞系。其原理是將外源基因克隆到具有某種抗性的載體上，通過轉染宿主細胞，外源基因整合到宿主染色體上，用載體中所含抗性基因進行篩選即可得到成功整合目的基因的細胞。
在試驗過程中，常用的真核表達載體抗性篩選標志物有嘌呤霉素(puromycin)、潮霉素(hygromycin)等。通過篩選可得到符合實驗要求的穩定高表達目的蛋白細胞株或者穩定沉默目的基因的細胞株。
其建立的原理是，將我們所要的目的基因真核到宿主細胞上，隨著細胞的生長繁殖，目的基因可以穩定的表達，在通過抗生素的不斷加壓篩選，得到構建穩定細胞系的過程。相對于瞬時轉染，穩定轉染技術持續周期長，細胞整合穩定，能夠滿足后期對蛋白的大量需求。
以下情況需要使用穩定細胞系：
1、實驗周期長，要求外源DNA在分裂細胞中長期表達，>2周。
2、需要構建誘導表達系統。當目的基因的過表達或者干擾需要時空特異性，或者會引起細胞毒性等不利影響。
3、基因敲除/插入等修飾宿主細胞基因組的實驗。
4、篩選拷貝數適宜的細胞。
5、對于某些很難轉染的細胞種類。即使病毒載體也無法實現高效率轉導。
6、通過構建穩定細胞株實現更好的基因干擾效果。
7、后續實驗中需要將轉染細胞注射進入動物體內。
8、需要構建單克隆細胞株可以去除個體差異。
好了就到這里吧，上海通蔚實業有限公司為您分享哪些情況需要使用穩定細胞系，希望可以幫助到大家。我司成立的初衷就定位于以人為本，以主打產品品質取勝的理念，為我們國家生命科學研究做一些力所能及的工作，做一家值得尊重并受人信賴的企業！產品免費運輸，如出現運輸質量問題，我們可以包退換貨，具有完善的庫存及供應體系以及高效穩定的純化技術，保證產品均能現貨供應和產品質量的穩定性。
上海通蔚生物科技有限公司
地址：上海市金山區楓涇鎮環東一路65弄2號3463室
主營產品：酶聯免疫試劑盒，食品農殘檢測，細胞系，培養基，胎牛血清
©2019 版權所有：上海通蔚生物科技有限公司 備案號：滬ICP備14033764號-3 總訪問量：1261808 站點地圖 技術支持：環保在線 管理登陸
